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猪链球菌病确诊方法

来源:养猪人必看 www.yangji120.com 发布时间:2015-03-30

  根据临床症状和病理变化,再结合流行病学特点不难作出初步诊断。确诊需进行实验室检查。

 

  (一)细菌学检查:取发病或病死动物的脓汁、关节液、鼻咽内容物、乳汁(乳房炎)、肝、脾、肾组织或心血等,任选2-3种,制成涂片或触片,干燥、固定、染色、镜检。应有革兰染色阳性,球形或椭圆形,并呈短链状排列的链球菌。

 

  (二)培养检查:选取上述病料,接种于含血液琼脂培养基,置37℃培养24h,应长出灰白色、透明、湿润黏稠、露珠状菌落。菌落周围出现α型或β型溶血环(猪、羊、兔链球菌为β型,牛、鱼为α型)。

 

  (三)动物接种:选取上述病料,接种于马丁肉汤培养基,经24h培养,取培养物注射实验动物或本动物,小鼠皮下注射0.1- 0.2mL或家兔皮下或腹腔注射0.1-1mL,应于2-3d内死于败血症,并应从实质脏器中分离出链球菌。但牛乳房炎以2mL经腹腔注射小鼠,观察半个月不死:羊病料培养物也可以1mL经皮下或静脉注射绵羊,于24-48h内死亡,并可从心血和脏器组织中分离出有荚膜的链球菌。鸡病料培养物以0.3-0.5mL,经皮下注射雏鸡应于第2天死亡。

 

  应用PCR:由国家卫生部与农业部疾病控制中心共同研制的PCR方法两小时可出结果。现在有多种分子生物学方法可用于猪链球菌感染的诊断、猪链球菌的分型和致病因子的鉴定。聚合酶链式反应(PCR)可直接鉴定扁桃体组织或拭子中的菌株,区分致病和非致病菌株。这样,可鉴定致病菌株的携带者。随机扩增多形态DNA反应(RAPD)可用于菌株分类。核酸分型和溶血活性测定可用于一些致病因子的鉴定。

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